Иммуноферментный анализ — ИФА

В основе иммуноферментного анализа (ИФА) лежит иммунное взаимодействие антигена с  антителом, которое проходит в несколько этапов.

Первая реакция ИФА происходит между иммуноглобулинами сыворотки пациента и антигеном возбудителя, фиксированным к поверхности лунок иммунологического планшета. После завершения первой реакции планшет отмывается, а на стенках лунок остается комплекс антиген-антитело.

ИФА является дополнительным исследованием, целью которого является наблюдение за динамикой болезни, а не установления диагноза. Сегодня выполнение наиболее сложных исследований и тестов возможно практически в каждом большом городе России.

Для выявления образовавшихся иммунных комплексов проводят вторую иммунологическую реакцию ИФА, в которой антигеном является связанный комплекс, а антителом — специфический к соответствующему иммуноглобулину (Ig) человека животный иммуноглобулин (кроличий), меченный ферментом (пероксидазой). После завершения второй иммунологической реакции лунки планшета повторно отмываются и подвергаются третьему этапу — ферментативной реакции с хромогеном (ортофенилендиамин — ОФД или тетраметилбензидин — ТМБ). В результате реакции образуется цветное вещество, интенсивность окраски которого определяется анализатором.

Чем выше оптическая плотность в данной лунке, тем большее количество специфических антител содержится в соответствующей пробе и, следовательно, выше является титр анализируемой сыворотки. При отсутствии в сыворотке исследуемых антител лунки остаются неокрашенными.

Результат иммуноферментного анализа сравнивается со значением критической оптической плотности («нормой»). Конечно, для каждой постановки будет своя величина критической оптической плотности. Сравнивать абсолютные значения оптической плотности при различных критических величинах некорректно. Правильнее сравнивать относительные значения кратности оптической плотности пробы сыворотки больного к критической оптической плотности в данной постановке, (оптическую плотность пробы сыворотки больного разделить на критическую оптическую плотность).

Сравнение данных, полученных в разных лабораториях, в которых применялись различные реактивы или модификации постановок, некорректно, особенно, если результаты представлены в разных единицах измерения.

В зарубежной литературе синонимом иммуноферментного анализа (ИФА) является аббревиатура ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).

Преимущества иммуноферментного анализа (ИФА):

— высокая чувствительность

— высокая специфичность

— воспроизводимость

— унифицированность

— малоинвазивность

— пригодность для массовых обследований

Возможность инструментальной оценки результатов иммуноферментного анализа также устраняет фактор субъективности.

Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе, так называемых, быстрых экспресс-тестов, когда реакция проходит на тест-полоске. Окраска продуктов реакции сравнивают со стандартной цветной шкалой: чем интенсивнее окраска, тем выше концентрация антител.

Иммуноферментный анализ (ИФА) является одним из наиболее распространенных методов лабораторной диагностики, и мнения врачей о его эффективности в целом положительные. Специалисты отмечают высокую чувствительность и специфичность этого метода, что позволяет точно выявлять различные заболевания, включая инфекционные и аутоиммунные. Врачи подчеркивают, что ИФА может использоваться для мониторинга состояния пациентов и оценки эффективности лечения. Однако они также предупреждают о необходимости правильной интерпретации результатов, так как на них могут влиять различные факторы, включая качество реагентов и условия проведения анализа. В целом, ИФА остается важным инструментом в арсенале современных медицинских технологий, способствующим более точной и своевременной диагностике.

Иммуноферментный анализ (ИФА) стал важным инструментом в диагностике различных заболеваний. Многие пациенты отмечают его высокую точность и чувствительность, что позволяет выявлять инфекции и иммунные расстройства на ранних стадиях. Врачам нравится, что методика проста в использовании и требует минимального времени для получения результатов. Однако некоторые люди выражают беспокойство по поводу возможных ложноположительных или ложноотрицательных результатов, что может привести к ненужным переживаниям или, наоборот, к запоздалому лечению. В целом, ИФА воспринимается как надежный метод, который значительно улучшает качество диагностики и мониторинга состояния здоровья.

Иммуноферментный анализ (ИФА) | Микробиология/Биохимия

Недостатки экспресс-метода ИФА:

— субъективность оценки результатов анализа,

— низкая чувствительность (25-65%), в связи с чем диагностируется лишь один случай болезни из четырех.

Поэтому экспресс-тесты не рекомендованы для широкого применения и должны проверяться с помощью аппаратного ИФА и других методов.

Следует помнить, что результаты ИФА не является самостоятельным основанием для постановки диагноза, потому что не всегда позволяют отличить имеющуюся и перенесенную болезнь, а также установить локализацию патологического процесса. Поэтому данную методику

обследования целесообразно использовать для малоинвазивного скрининга групп риска TORCH-инфекций, в том числе, беременных.

Следует иметь в виду, что чувствительность и специфичность серологических методов у новорожденных существенно ниже, чем у детей старшего возраста и взрослых, что связано с особенностями иммунного ответа и присутствием в их крови материнских антител.

У пациентов с клиническими симптомами заболевания для диагностики или контроля излеченности следует отдавать предпочтение прямым методам исследования, которые устанавливают наличие подозреваемого возбудителя, а не антител к нему, так что метод ИФА в данном случае находится на втором плане.

При выявлении специфических иммуноглобулинов в сыворотке крови устанавливается предварительный диагноз, а при положительном результате прямых методик исследования выставляется окончательный диагноз. 

Вопрос-ответ

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Что выявляет иммуноферментный анализ ИФА?

С помощью ИФА можно определить присутствие в крови любого антигена – как собственного, так и чужеродного для организма. Однако в реальности анализ назначают только при наличии конкретных подозрений.

В чем разница между ИФА и иммуноферментным анализом?

ИФА (иммуноферментный анализ), также известный как ИФА (иммуноферментный анализ), выявляет и измеряет уровень антител в образцах крови человека в ответ на специфические антигены. ИФА-тесты также используются для определения концентрации витамина D, инсулина, антигенов COVID-19 или гепатита в образцах.

Иммуноферментный анализ

Что значит, если ИФА положительный?

Положительный результат иммуноферментного анализа (ИФА) на инфекции указывает на то, что человек подвергся воздействию патогена или имеет продолжающуюся инфекцию.

Какие болезни показывает ИФА?

Иммуноферментный анализ (ИФА) используется для диагностики различных инфекционных и неинфекционных заболеваний, включая вирусные инфекции (например, ВИЧ, гепатиты, коронавирусы), бактериальные инфекции (например, сифилис, хламидиоз), аутоиммунные заболевания (например, системная красная волчанка, ревматоидный артрит) и аллергические реакции. Этот метод позволяет выявлять антитела или антигены в образцах крови, что помогает в ранней диагностике и мониторинге заболеваний.

Советы

СОВЕТ №1

Перед проведением иммуноферментного анализа (ИФА) обязательно проконсультируйтесь с врачом. Он поможет определить, какие именно анализы вам нужны, и объяснит, как правильно подготовиться к процедуре.

СОВЕТ №2

Обратите внимание на сроки выполнения анализа и получения результатов. ИФА может занять от нескольких часов до нескольких дней, в зависимости от лаборатории. Планируйте свои действия заранее, чтобы не возникло задержек в диагностике.

СОВЕТ №3

Убедитесь, что лаборатория, в которой вы будете проходить ИФА, имеет все необходимые лицензии и сертификаты. Это гарантирует качество и надежность получаемых результатов.

СОВЕТ №4

После получения результатов анализа обсудите их с врачом. Не стесняйтесь задавать вопросы и уточнять непонятные моменты, чтобы полностью понять свое состояние и дальнейшие шаги.