Принципы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний

Существуют прямые и косвенные методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний.

С помощью прямых методов лабораторной диагностики в биологическом материале (крови, моче и проч.) выявляются микроорганизмы, их антигены или ДНК.

Прямые методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний:

• бактериоскопия (микроскопия) – выявление возбудителя под микроскопом
• прямая или косвенная иммунофлюоресценция антигенов – под микроскопом видно свечение на поверхности возбудителя, который был предварительно обработан специальными веществами
• выявление ДНК – метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)
• бактериологический метод — выделение возбудителя на питательной среде (бактерии) или культуре клеток (вирусы).

Врачи подчеркивают важность принципов лабораторной диагностики инфекционных заболеваний для своевременного и точного выявления патогенов. Основным этапом является сбор анамнеза и клинических данных, что позволяет выбрать оптимальные методы исследования. Лабораторные тесты, такие как ПЦР, серологические и микробиологические исследования, помогают определить не только наличие инфекции, но и ее тип, что критично для назначения адекватного лечения. Врачи отмечают, что правильная интерпретация результатов требует глубоких знаний и опыта, так как многие инфекции могут иметь схожие симптомы. Кроме того, важно учитывать возможность перекрестных реакций и влияние сопутствующих заболеваний на результаты. Таким образом, комплексный подход к лабораторной диагностике является залогом успешного лечения инфекционных заболеваний.

1. Лабораторная диагностика инфекционных болезней

Косвенные методы диагностики лабораторной диагностики инфекционных заболеваний

Типичными косвенными методами диагностики лабораторной диагностики инфекционных заболеваний являются серологические исследования, в основе которых лежит определение специфических к возбудителю инфекции антител:

• иммуноглобулинов М (IgМ),
• иммуноглобулинов G (IgG),
• иммуноглобулинов А (IgА).

Для сравнения качества, надежности и достоверности различныхметодик используют понятие диагностической специфичности и чувствительности, объективности и субъективности.

Чувствительность — вероятность получения положительного результата исследования при имеющейся болезни (результат одинаковый с истинным). Чем выше чувствительность метода, тем больше шансов диагностировать болезнь с первого раза, но и им чаще можно получить ложноположительный результат у здорового человека (гипердиагностика).

Специфичность — вероятность получения отрицательного результата при отсутствии болезни. Чем выше специфичность метода, тем чаще можно получить ложнонегативный результат у больного человека (гиподиагностика). В рутинной практике под специфичностью преимущественно понимают степень соответствия между полученным результатом и истинным состоянием. Чем больше специфичность, тем больше уверенность в том, что обнаружен истинный, именно тот показатель, который исследовали, например, антиген или антитело конкретного возбудителя.

Высокая чувствительность метода позволяет выявить болезнь, а высокая специфичность — подтвердить правильность результата.

Субъективность — восприятие результатов анализов и непосредственно человеком, без использования аналитического оборудования. Субъективные методы исследования (микроскопия, неаппаратные серологические исследования) преимущественно имеют два варианта результатов — положительный и отрицательный. Точность ответа в таких случаях сильно зависит от опытности и знаний лаборанта.

Объективность — восприятие результатов анализов посредством аналитического оборудования, например ИФА-анализатора, спектрофотометра, различных датчиков. Такие методики более точные, результаты представляются в числовом диапазоне.

Культуральный метод (выращивание бактерий на питательных средах – бактериологический посев мочи, крови) обеспечивает высокую специфичность анализа, однако имеет ряд недостатков:

1. трудоемкость
2. продолжительность выполнения исследования (в течение 1-5 и более суток)
3. большие материальные затраты и привлечения высококвалифицированных специалистов

Бактериоскопический метод (световая микроскопия) имеет низкую специфичность и чувствительность по сравнению с прямой иммунофлуоресценцией и ПЦР.

Иммунофлюоресцентные методики (прямая имунофлюоресценция — ПИФ, непрямая иммунофлюоресценция — НПИФ) основаны на феномене свечения специального красителя при люминесцентной микроскопии.

Методы ПИФ и НПИФ похожи, и отличаются только техникой обработки препаратов реактивами. При методе ПИФ образец биоматериала обрабатывается меченными флюорохромом антителами сразу, за один раз. При методе НПИФ постановка реакции проводится в два этапа: сначала препарат обрабатывают специфическими немечеными антителами, в результате чего образуется комплекс антиген-антитело, с которым на втором этапе реагируют меченные флюорохромом антитела. Чувствительность и специфичность этих разновидностей флюоресцентного метода не отличаются и составляют 80-95%.

Методом ПИФ предусмотрена диагностика хламидиоза, уреаплазмоза, микоплазмоза, методом НПИФ — вируса простого герпеса, цитомегаловируса, гонореи, трихомониаза и других инфекций. Выполнение этих методик предусматривает специальную подготовку как врача, который должен правильно провести забор материала так и врача-лаборанта, который должен правильно выполнить обработку материала и оценить результат с минимальной субъективностью.

Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний занимает важное место в современном здравоохранении. Многие специалисты отмечают, что точность и скорость диагностики напрямую влияют на эффективность лечения. Врачи подчеркивают, что современные методы, такие как ПЦР и серологические тесты, позволяют выявлять инфекции на ранних стадиях, что особенно критично для предотвращения распространения заболеваний. Пациенты, в свою очередь, часто выражают благодарность за возможность быстро получить результаты анализов, что помогает им лучше понимать свое состояние и принимать обоснованные решения о лечении. Однако некоторые люди также высказывают опасения по поводу возможных ошибок в интерпретации результатов и важности квалификации медицинского персонала. В целом, большинство согласны с тем, что лабораторная диагностика является неотъемлемой частью борьбы с инфекциями и улучшения качества медицинской помощи.

Важные понятия серодиагностики

Титр антител — полуколичественное выражение содержания неспецифических антител в сыворотке крови в виде дроби, где показана наибольшая степень разведения исследуемой сыворотки, при которой анализ дает положительный результат.

Так, обычно, используется серия последовательных двукратных разведений, значение титра выходят кратными 2: 1:2, 1:4, 1:8 … до 1:100, 1:200, 1:400 и т.д. Чем больше знаменатель дроби, тем выше концентрация антител в пробе.

Современная постановка иммуноферментного анализа проводится на анализаторах оптической плотности пробы, где вместо титра используют количественный показатель, выраженный в международных единицах (MO, IU), или единицах те оптической плотности (ОП), иммуноферментных единицах (IEU) или в нанограммах на литр.

Традиционно под титром антител понимают их количество в сыворотке крови независимо от единиц измерения.

Критическая оптическая плотность (контрольный уровень оптической плотности) — величина, которая рассчитывается по специальным формулам выполнения контрольных проб каждой тест-системы. Согласно значению оптической плотности критической определяется степень положительности исследуемых проб.

Результат исследования считается положительным, если он превышает значения оптической плотности критической на определенную величину, которая зависит от вида тест-системы. Все расчеты ведутся в лаборатории, после чего выдается значение результата – положительный, сомнительный, отрицательный и цифровой показатель пробы. На практике критическую оптическую плотность часто называют «нормой» и записывают «N =…».

Серая зона — это диапазон низких концентраций специфических антител, от уровня критической величины к положительному результату анализа. В серую зону с равной вероятностью могут попадать как положительные, так и отрицательные пробы.

Результаты анализа, соответствующие серой зоне, преимущественно обозначаются как сомнительные, и не могут быть однозначно интерпретированы. Поэтому, для уточнения результата, необходимо повторить исследование с новым образцом сыворотки, прикрепленные через 1-2 недели, или провести дообследование по другой методике, в частности ПИФ, ПЦР.

Принципы диагностики и лечения инфекционных болезней. Лекция для студента и практикующего врача.

Вопрос-ответ

Какие лабораторные методы диагностики используются при инфекционных заболеваниях?

При диагностике инфекционных заболеваний используются различные лабораторные методы, включая микробиологические (посевы на питательные среды для выявления патогенов), серологические (определение антител к инфекциям), молекулярно-генетические (ПЦР для выявления ДНК или РНК возбудителей), а также иммунохимические методы (например, тесты на антигены). Эти методы помогают установить диагноз, определить возбудителя и оценить его чувствительность к антибиотикам.

Методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний ЛОР-органов – Ненашева О.Ю.

Каковы принципы инфекционных заболеваний?

Этапы развития инфекционного заболевания таковы: (1) источник микроба, (2) утечка микроба из источника, (3) распространение микроба на нового человека, (4) проникновение микроба в нового человека и (5) инфицирование и повреждение.

Какой метод лабораторной диагностики подтверждает наличие инфекции?

Методом лабораторной диагностики, который подтверждает наличие инфекции, является микробиологическое исследование, включая посев на питательные среды, что позволяет выявить патогенные микроорганизмы. Также важными методами являются серологические тесты для определения антител к инфекционным агентам и молекулярно-генетические методы, такие как ПЦР, для обнаружения ДНК или РНК возбудителей.

Советы

СОВЕТ №1

Изучите основные методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, такие как микробиологические, серологические и молекулярно-генетические. Понимание этих методов поможет вам лучше ориентироваться в выборе подходящего теста для диагностики конкретного заболевания.

СОВЕТ №2

Обратите внимание на важность предварительной подготовки к лабораторным исследованиям. Соблюдение рекомендаций по сбору образцов (например, времени суток, условий хранения) может существенно повлиять на точность результатов.

СОВЕТ №3

Не забывайте о значении интерпретации результатов. Консультируйтесь с врачом для правильного понимания полученных данных, так как результаты могут зависеть от множества факторов, включая индивидуальные особенности пациента и стадию заболевания.

СОВЕТ №4

Следите за новыми методами и технологиями в области лабораторной диагностики. Научные исследования и разработки постоянно улучшают точность и скорость диагностики, что может значительно повлиять на эффективность лечения инфекционных заболеваний.